کالیپروتکتین و لاکتوفرین شانه جریان جانبی کاست تست سریع در مدفوع انسانی گواهی شده
برنامه های کاربردی:
کاست تست آزمایشی کالپروتکتین و لاکتوفرین کامبو سریع (مدفوع) یک روش ایمنی کروماتوگرافی سریع برای تشخیص کیفی
کالپروتکتین و لاکتوفرین در نمونه مدفوع انسان که می تواند برای تشخیص اختلالات التهابی دستگاه گوارش مفید باشد.
شرح:
کالپروتکتین یک دیمر 24 کیلو دالتونی پروتئین های اتصال دهنده کلسیم S100A8 و S100A9 است. این مجموعه تا 60٪ از پروتئین محلول سیتوزول نوتروفیل را تشکیل می دهد. کالپروتکتین از طریق ریختن لکوسیت ها ، ترشح فعال ، اختلال در سلول و مرگ سلولی در لومن روده در دسترس می باشد. بنابراین افزایش سطح کالپروتکتین مدفوع حاکی از انتقال نوتروفیل ها به مخاط روده است که در هنگام التهاب روده رخ می دهد. کالپروتکتین فیکال برای تشخیص التهاب روده استفاده شده است و می تواند به عنوان نشانگر بیماری های التهابی روده باشد. کالپروتکتین به عنوان یک نشانگر مفید است ، زیرا در برابر تخریب آنزیمی مقاوم است و به راحتی در مدفوع قابل اندازه گیری است.
لاکتوفرین یکی از مؤلفه های سیستم ایمنی بدن است. این فعالیت ضد میکروبی (باکتریوئیدها ، قارچ کش ها) دارد و بخشی از دفاع ذاتی است ، بطور عمده در مخاط. به ویژه ، لاکتوفرین فعالیت ضد باکتریایی را در نوزادان انسان فراهم می کند.
لاکتوفرین انسانی ، یک گلیکوپروتئین مشتق از نوتروفیل ، می تواند در مدفوع و لاواژ کامل روده به عنوان شاخص التهاب روده در IBD و گاستروانتریت عفونی اندازه گیری شود. مطالعات اخیر لاکتوفرین مدفوع (FL) را به عنوان یک نشانگر حساس برای IBD در کودکان نشان داده است. علاوه بر این ، این نشانگر زیستی می تواند به عنوان راهنمایی برای هدایت فرایند تشخیصی و درمانی برای کودکان و بزرگسالان مبتلا به IBD کمک کند.
چگونه استفاده کنیم؟
به آزمایش ، نمونه ، بافر و / یا کنترل ها اجازه دهید قبل از آزمایش دمای اتاق (15-30 درجه سانتیگراد) برسد.
1.To جمع آوری نمونه مدفوع:
مقدار کافی از مدفوع (1-2 میلی لیتر یا 1-2 گرم) را در یک ظرف جمع آوری نمونه خشک و خشک جمع کنید تا حداکثر آنتی ژن (در صورت وجود) بدست آید. اگر سنجش در 6 ساعت پس از جمع آوری انجام شود ، بهترین نتیجه بدست می آید. اگر در مدت 6 ساعت آزمایش نشود ، نمونه های جمع آوری شده ممکن است به مدت 3 روز در دمای 2-8 ذخیره شوند. برای نگهداری طولانی مدت ، نمونه ها باید زیر -20 kept نگه داشته شوند.
2.To پردازش نمونه های مدفوع:
• برای نمونه های جامد:
درپوش لوله جمع آوری نمونه را ببندید ، سپس به طور تصادفی در 3 مکان مختلف ، اپلیکاتور جمع آوری نمونه را درون نمونه مدفوع قرار دهید تا تقریباً 50 میلی گرم مدفوع جمع شود (معادل 1/4 نخود). نمونه مدفوع را نخورید.
• برای نمونه های مایع:
قطره چکان را به صورت عمودی نگه دارید ، نمونه مدفوع آسپیرات را بگیرید و سپس 2 قطره (تقریباً 80 میکرولیتر) را درون لوله جمع آوری نمونه حاوی بافر استخراج منتقل کنید.
3. درپوش را روی لوله جمع آوری نمونه بچسبانید ، سپس لوله جمع آوری نمونه را با شدت تکان دهید تا نمونه و بافر استخراج مخلوط شود. لوله را به مدت 2 دقیقه بگذارید.
4. کیسه را قبل از باز کردن ، دمای آن را گرم کنید. کاست تست را از کیسه فویل جدا کرده و ظرف یک ساعت از آن استفاده کنید. اگر آزمایش بلافاصله پس از باز کردن کیسه فویل انجام شود ، بهترین نتیجه حاصل می شود.
5. لوله جمع آوری نمونه را به صورت راست ببندید و درپوش را روی لوله جمع آوری نمونه باز کنید. لوله جمع آوری نمونه را معکوس کنید و 2 قطره کامل از نمونه استخراج شده (تقریبا 80 میکرولیتر) را به هر چاه نمونه از کاست آزمایش منتقل کنید ، سپس تایمر را شروع کنید. از بهم زدن حباب های هوا در چاه نمونه (S) خودداری کنید. تصویر زیر را ببینید.
6. نتایج را در 5 دقیقه پس از توزیع نمونه بارگیری کنید. نتایج را بعد از 10 دقیقه مطالعه نکنید.
7. نکته: اگر نمونه مهاجرت نمی کند (وجود ذرات) ، نمونه های استخراج شده موجود در ویال بافر استخراج را سانتریفیوژ کنید. 80 میکرولیتر از لیتر رویی را جمع آوری کرده ، درون هر چاه نمونه ای از کاست تست جدید ریخته و با رعایت دستورالعمل های ذکر شده در بالا مجدداً شروع به کار کنید.
تفسیر نتایج
(لطفا به تصویر بالا مراجعه کنید)
مثبت: * دو خط رنگی ظاهر می شود. یک خط رنگی باید در ناحیه خط کنترل (C) باشد و دیگری خط رنگی آشکار باید در ناحیه خط تست (T) باشد.
* توجه: شدت رنگ در منطقه خط آزمون (T) بسته به غلظت کالپروتکتین و لاکتوفرین موجود در
نمونه بنابراین ، هر سایه رنگی در ناحیه خط آزمون (T) باید مثبت تلقی شود.
منفی: یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل (C) ظاهر می شود. هیچ خطی در ناحیه خط تست (T) ظاهر نمی شود.
INVALID: خط کنترل ظاهر نمی شود. کمبود حجم نمونه یا روشهای نادرست رویه ای محتمل ترین دلایل خط کنترل هستند
شکست. روش را مرور کنید و تست را با یک آزمایش جدید تکرار کنید. اگر مشکل همچنان ادامه داشت ، بلافاصله از کیت تست استفاده کنید و با توزیع کننده محلی خود تماس بگیرید.
